禽传染性支气管炎病毒检测试剂盒适用于禽支气管炎病毒检测，可用于临床禽支气管炎病毒感染的辅助诊断，但不作确诊使用。

产品型号：50T

更新时间：2025-06-30

厂商性质：生产厂家

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PCR试剂盒

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禽白血病病毒检测试剂盒的安全使用指南

禽白血病病毒检测试剂盒设计通常包含多个关键组件

鸡传染性法氏囊病毒检测试剂盒的预期用途

鸡传染性法氏囊病毒检测试剂盒使用注意事项

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　　一、禽传染性支气管炎病毒检测试剂盒

　　二、通用名称：禽传染性支气管炎病毒检测试剂盒（实时荧光PCR法）

　　三、包装规格 50T/盒

　　四、预期用途：

　　适用于禽支气管炎病毒检测，可用于临床禽支气管炎病毒感染的辅助诊断，但不作确诊使用。

　　五、禽传染性支气管炎病毒检测试剂盒原理：

　　针对禽支气管炎病毒基因组高度保守区域设计特异性引物和探针，在反应体系中含禽支气管炎基因组模板的情况下，PCR反应得以进行并释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪对PCR过程中相应通道信号进行实时监测和输出，实现检测结果的定性分析。

检验方法
1. 试剂准备（试剂准备区）

（1）从冰箱中取出试剂盒, 从试剂盒中取出实验所需试剂,充分融化混匀并瞬时离心以去除管壁附着液体。

（2）核算当次实验所需要的反应数（n），并根据如下表所示反应体系计算当次实验所需要的各种试剂量。

n =阴性对照数（1T）+阳性对照数（1T）+误差预留量（1T）+样本数

单反液配制表(每份)	RT-PCR反应液	15.0 μL
	逆转录酶	2.0 μL
	Taq酶	3.0 μL

(3)在无菌离心管中加入上述试剂，充分混匀后瞬时离心。按照20 μL/管分装量将试剂分装至PCR反应管。

2.样本准备（样本处理区）

用QIAGEN、Roche公司RNA提取试剂盒提取RNA，具体操作按照其试剂盒说明书操作。

3.加样

在上述制备好的PCR反应样本管中分别加入处理好的待测标本RNA各5 μl、终体积25 μl/管，盖好PCR反应盖混匀后瞬时低速离心，转移到PCR仪器上。阴性对照和阳性对照管则各加5 μL试剂盒自带的阴性对照或阳性对照品，终体积为25 μl/管，盖好PCR反应盖混匀后瞬时低速离心，转移到PCR仪器上。

4. PCR（PCR扩增区）

（1）取样本处理区准备好的PCR反应管，放置在实时荧光定量PCR仪样品槽相应位置，并记录放置顺序。

（2）按下表设置仪器核酸扩增相关参数进行PCR扩增。

反应体积	25 μL	通道选择	FAM通道采集禽白血病病毒荧光信号
PCR 反应条件	步骤	条件	循环数
	反转录	42℃：10分钟（min）	1
	预变性	95℃：3分钟（min）	1
	预扩增	95℃：5秒（s）	5
	预扩增	55℃：40秒（s）	5
	PCR扩增	95℃：5秒（s）	40
	PCR扩增	55℃：40秒（s）（此阶段结束时采集荧光信号）	40

注：ABI系列荧光PCR仪在设置时不选ROX校正，设置淬灭基团选择 None。

【参考值（参考范围）】

1.试剂盒有效性判定：

（1）阳性对照：有典型S型扩增曲线或Ct值≤35。

（2）阴性对照：Ct值＞38或无Ct值，线形为直线或轻微斜线，无指数增长期。

2.标本结果判定：

（1）阳性：标本检测结果Ct值≤35或有明显指数增长期。

（2）可疑：标本检测结果Ct值在35～38范围内。此时应对标本进行重复检测，如重复实验结果Ct值仍在35～38范围内，有明显指数增长期，则判定为阳性，否则为阴性。

（3）阴性：标本检测结果Ct值＞38或无Ct值。

【检验结果的解释】

通道及检测结果	标本检测结果解释
FAM	标本检测结果解释
+	标本中检出禽白血病病毒RNA
-	标本中未检出禽白血病病毒 RNA