一、猴子内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA定量试剂盒实验详细介绍
中文名称:猴子内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA定量试剂盒实验
规格: 48T /96T
品牌:臻科生物
种属:猴ELISA试剂盒
检测波长:450 nm
所需样本体积: 50ul
适用范围:仅供科研,不得用于临床诊断。
保存及有效期:2-8℃,六个月
检测样本种类:用于测定血清,血浆及相关液体等样本的含量或者表达。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
臻科生物供应的种属有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、昆虫、猪牛羊、鸡鸭鹅、植物ELISA试剂盒等
二、实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猴子内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)水平。用纯化的猴子内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入内皮型一氧化氮合成酶(eNOS),再与HRP 标记的内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中猴子内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)浓度。
三、试剂盒组成
1 | 30 倍浓缩洗涤液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1 瓶 | 8 | 标准品(240 pmol/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12 孔×8 条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 说明书 | 1 份 |
5 | 显色剂A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 张 |
6 | 显色剂 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 个 |
四、操作步骤
五、试剂盒计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
六、注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔*孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请Zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
七、特别提醒
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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