猪伪狂犬病毒阻断ELISA抗体试剂盒使用说明

猪伪狂犬病毒阻断ELISA抗体试剂盒

【兽用名称】

通 用 名  猪伪狂犬病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒

商 品 名  无

英 文 名    Blocking ELISA Kit for Detection Pseudorabies Virus   Antibody  

汉语拼音  Zhu WeikuangquanbingbingdugBdanbai Zuduan ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要组分与含量】

【作用与用途】  用于检测猪伪狂犬病毒抗体。

【注意事项】

（1）  试剂盒使用前各试剂应平衡至20～25℃，使用后放回2～8℃保存。

（2）  不同批号的试剂盒组分不得混用，不同试剂使用时应防止交叉污染。

（3）  底物液和终止液不能暴露于强光或接触氧化剂。

（4）  待检血清数量较多时，应先稀释完所有待检血清，再加到抗原包被板上，使反应时间一致。

（5）  移液时应尽量准确，防止产生气泡。

（6）  应严格遵守各操作步骤规定的时间和温度。【用法与判定】  

1  用法

1.1  样品准备  取动物全血，待血液凝固后，4000r/min离心10分钟，收集上清。或采集血液，待凝固后自然析出血清。血清应清亮，无溶血。

1.2  样品稀释  在血清稀释板中，用样品稀释液按1:1的比例稀释待检血清（例如：120μl样品稀释液中加120μl待检血清）；阴性、阳性对照不稀释，直接使用。

1.3  洗涤液配制20倍浓缩洗涤液使用前应恢复至室温（20~25℃），然后用蒸馏水或纯水作20倍稀释。

1.4  操作步骤

1.4.1  取抗原包被板（根据样本多少，可拆开分次使用），每孔加入稀释好的洗涤液300µl，不必静置，弃掉孔中洗涤液，洗涤2次，拍干。每孔加入稀释好的样本100μl；另外设阳性对照、阴性对照各2孔，100μl/孔。置37℃孵育60分钟。

1.4.2  弃去板中液体，每孔加入稀释好的洗涤液300µl，弃掉孔中洗涤液，重复洗涤共计洗板5次，拍干。

1.4.3  每孔加入100μl酶结合物，轻微振荡混匀。置37℃下孵育30分钟。

1.4.4  弃去板中液体，洗涤5次，方法同1.4.2。

1.4.5  每孔加底物显色液100µl，室温（20~25℃）避光显色10分钟。

1.4.6  每孔加终止液50µl。10分钟内用酶标仪测定并记录各孔在630nm波长处的吸光度（OD）值。

2  判定

2.1  成立条件   阴性对照孔的OD630nm平均值与阳性对照孔OD630nm平均值之差应≥0.6。

2.2  判定标准  S为样品孔OD_630nm值，N为阴性对照OD_630nm平均值。如果S/N≤0.6判为阳性。如果0.6＜S/N≤0.7判为可疑。如果S/N＞0.7判为阴性。在酶标仪上测各孔OD_630nm值，试验成立条件是阴性对照的OD_630nm平均值≥0.6，阳性对照的OD_630nm平均值≤0.5

【规格】  96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒

【贮藏与有效期】  2~8℃保存，有效期为12个月。

仅供科研使用