猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒说明书

 猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒说明书

【兽用名称】 

通 用 名:猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒

商 品 名 无

英 文 名:Diagnostic Kit For Antibodies To PorcinReproductive and Respiratory Syndrome Virus（PRRSV Ab）,ELISA

汉语拼音:Zhufanzhiyuhuxibingdu ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要组分与含量】

                                          【作用与用途】  用于检测猪血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体。

【注意事项】

（1）实验前，将试剂盒所有组分取出置温箱（25℃± 3） 回温至少30 分钟，实验完成后 放回2～8℃保存。

（2）若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物，属正常现象。

（3）请在试剂盒规定的有效期内使用；禁止非同批试剂盒混用。

（4）没有用完的抗原包被板应贮存在密封塑料袋内，于 2～8℃存放。

（5）避免底物显色液暴露于强光，避免接触氧化剂。

（6）先使用血清稀释板稀释完所有的待检血清，再将稀释好的血清转移到抗原包被板上， 使反应时间一致。

（7）浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。

（8）严格按照操作程序，仔细的吸液、计时，充分洗涤，对于获得精确的结果是非常必 要的。

（9）用过的材料要无害化处理，处理时遵照当地、区域以及国家法规。

【用法与判定】

1    用法

1. 1    样品准备  取动物全血，待血液凝固后， 以 4000r/min 离心 10 分钟，收集血清； 或待血液凝固后自然析出血清，再收集血清。血清应清亮，无溶血。

1.2    洗涤液配制  使用前，将 10 倍浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水作 10 倍稀释（例如： 10ml 的浓缩洗涤液加上 90ml 纯水），混匀。置 2~8℃保存，可保存 7 日。

1.3    待检血清和对照的稀释

1.3. 1    待检血清的稀释   用试剂盒提供的样本稀释液将样本作40倍稀释 （例:将5 μl样本加至195 μl样本稀释液中）。

1.3.2    对照的稀释  阴阳对照不用稀释。

1.4    操作步骤

1.4. 1    加样：根据样本数量，取所需板条，检测时，设阴、阳性对照各2孔，分别加入不用稀释的阴、阳性对照血清100 μl于相应孔中（可不设空白对照）。其余为样本孔，每孔加100 μl用样本稀释液稀释好的样本。

1.4.2    温育：加样后，盖上盖板膜，置37 ℃温育30 min。

1.4.3    洗板：甩去孔内液体，用洗涤液注满反应板孔，静置10 s，直接甩出，洗涤3次，最后一次洗涤后吸干板内液体。

1.4.4    加酶：每孔加酶标记物100 μl。

1.4.5    温育：加好酶标记物的反应板盖好盖板膜，置37 ℃温育30 min

1.4.6    洗板：同步骤1.4.3。

1.4.7    显色：每孔加显色剂100 μl，振荡混匀，37 ℃避光反应10 min。

1.4.8    终止：每孔加终止液50 μl，振荡10 s，充分混匀，终止后即读数。

1.4.9    读数：以450 nm/ 630 nm双波长检测，读取各孔吸光度值（OD值）。充分混匀，终止后即读数。

2    判定

2. 1    成立条件  阳性对照孔的平均OD值≥0.60，阴性对照孔的平均OD值＜0.40。

2.2    结果判定  样品中抗体存在与否，或样本中抗体的相对水平的高低由S/P值决定，S/P值计算时按以下方式处理:

S/P=(样本OD450/630值－NC)/(PC－NC)

其中NC表示阴性对照孔平均OD450/630值（若小于0.05，则按照0.05计算），

PC表示阳性对照孔平均OD450/630值；

当样本的S/P≥0.20时判为阳性；

样品S/P值＜0.20时判为阴性。

【规格】  96 孔/盒或192 孔/盒

【贮藏与有效期】  2~8℃保存，有效期为 12 个月 

仅供科研使用