猪圆环病毒 3-dCap-ELISA 抗体试剂盒造作指南

猪圆环病毒 3-dCap-ELISA 抗体试剂盒造作指南

【兽用名称】

通 用 名  猪圆环病毒 3-dCap-ELISA 抗体检测试剂盒

商 品 名  无

英 文 名  Porcine circovirus 3-dCap antibody ELISA kit

汉语拼音  Zhuyuanhuanbingdu 3-dCap-ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要组分与含量】

【作用与用途】  用于检测猪圆环病毒 3 型抗体。

【注意事项】

（1）实验前，将试剂盒所有组分取出置温箱（25℃± 3） 回温至少30 分钟，实验完成后 放回2～8℃保存。

（2）若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物，属正常现象。

（3）请在试剂盒规定的有效期内使用；禁止非同批试剂盒混用。

（4）没有用完的抗原包被板应贮存在密封塑料袋内，于 2～8℃存放。

（5）避免底物显色液暴露于强光，避免接触氧化剂。

（6）先使用血清稀释板稀释完所有的待检血清，再将稀释好的血清转移到抗原包被板上， 使反应时间一致。

（7）浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。

（8）严格按照操作程序，仔细的吸液、计时，充分洗涤，对于获得精确的结果是非常必 要的。

【用法与判定】

1    用法

1. 1    样品准备  取动物全血，待血液凝固后， 以 4000r/min 离心 10 分钟，收集血清； 或待血液凝固后自然析出血清，再收集血清。血清应清亮，无溶血。

1.2    洗涤液配制  使用前，将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水作 20 倍稀释（例如： 10ml 的浓缩洗涤液加上 190ml 纯水），混匀。置 2～8℃保存，可保存 7 日。

1.3    待检血清和对照的稀释

1.3. 1    待检血清的稀释  将待检血清在血清稀释板中按 1:40 稀释（例如：195μl 样品稀 释液中加 5μl 待检血清）。

1.3.2    对照的稀释  阴、阳性对照按 1:4 稀释（例如：180μl 样品稀释液中加 60μl 对照）。

1.4    操作步骤

1.4. 1    取抗原包被板（根据样品多少，可拆开分次使用），每孔加入稀释好的洗涤液  300µl ，无需静置，甩掉孔中的洗涤液，重复洗涤共计 2 次，最后一次在吸水材料上拍干。

1.4.2    将稀释好的待检血清、阴性对照和阳性对照各取 100μl 加入到抗原包被板中，待 检血清设 1 孔，阴、阳性对照各设 2 孔。轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置 37℃温育 30 分 钟。

1.4.3    甩掉板孔中的液体，每孔加入稀释好的洗涤液 300µl ，无需静置，甩掉板孔中的 洗涤液，重复洗涤共计 5 次，最后一次在吸水材料上拍干。

1.4.4    每孔加入酶标记物 100μl ，置 37℃温育 30 分钟。

1.4.5    洗板 5 次，方法同 1.4.3。

1.4.6    每孔加入底物显色液 100μl ，置室温（20~25℃) 避光显色 10 分钟。

1.4.7    每孔加入终止液 50µl ，10 分钟内在酶标仪上测各孔 OD630nm 值。

2    判定

2. 1    成立条件  阳性对照 OD630nm 平均值≥0.5 ，阴性对照 OD630nm 平均值＜0.3。

2.2    判定标准  S 为样品 OD630nm 值，P 为阳性对照 OD630nm 平均值，N 为阴性对照 OD630nm 平均值。

如果样品（S-N）/（P-N）值≥0.16 ，判为阳性；

如果样品（S-N）/（P-N）值＜0.16 ，判为阴性。

【规格】  96 孔/盒或192 孔/盒

【贮藏与有效期】  2～8℃保存，有效期为 12 个月 

仅供科研使用